Çapraz testler: ne için, teknik ve temel, aşamalar

Çapraz testler, bir donörden gelen kan ürünlerinin (özellikle tam kan ve küresel konsantre) alıcının kanıyla uyumlu olup olmadığını belirlemek için yapılan bir dizi laboratuvar çalışmasıdır.

ABO uyumluluğuna ve Rh faktörüne ek olarak tamamlayıcı bir testtir. Çapraz test etmenin nedeni, bazen iki kişinin (donör alıcı) aynı ABO ve Rh grubuna sahip olabileceği, ancak kanlarının hala uyumsuz olmasıdır.

Bu uyumsuzluk, küçük antijenler olarak bilinen bir dizi kırmızı kan hücresi proteinine karşı antikorların varlığından kaynaklanmaktadır. Bu antijenler, kan grubu (ABO) ve Rh faktörü ile yapıldığı gibi rutin olarak değerlendirilmez.

Bunun nedeni, küçük antijenlerin çok daha az sık olması ve her bireyin değişken bir ekspresyonuna sahip olmasıdır, bu yüzden onları grup ve Rh faktörü ile olduğu gibi kategoriler halinde gruplandırmak neredeyse imkansızdır.

Bunun yerine, donör kırmızı kan hücreleri, antijen-antikor reaksiyonlarının varlığını tespit etmek için hastanın serumuyla (majör uyumluluk testi) hastanın donör serumuyla (küçük uyumluluk testi) karıştırılır.

Küçük antijenlere karşı antikorlar olduğunda, hastanın veya vericinin serumunda, testin pozitif olduğu söylenir, bu nedenle çoğu durumda belirli bir kan ünitesinin transfekte edilememesi söz konusudur.

ABO Grubu

İlk önce çapraz reaksiyonların tedavi edildiğini iyi anlamak için kan grupları hakkındaki temel bilgileri bilmek gerekir.

Bu anlamda en önemli şey, kanın dört gruba ayrılabileceğini bilmektir: A, B, AB ve O.

Bu grupların her biri, kırmızı kan hücrelerinin yüzeyinde, farklı bir grubun potansiyel bir reseptörünün antikorları tarafından yabancı bir element olarak tanımlanan belirli bir proteini (antijen) eksprese eder.

Kan uyumluluğu açısından antijen-antikor reaksiyonlarının en çarpıcı yanı, antikorların var olması için antijene önceden maruz kalmanın gerekli olmamasıdır. Bu, doğal antikorlar olarak bilinir.

Doğal antikorlar

Genel olarak, antikorların bir bireyin vücudunda bulunması için, beyaz kan hücrelerinin daha önce antijene maruz kalması gerekir.

Bu, yabancı antijen ile organizma arasındaki ilk temasta, ilk temastan sonra daha sonra üretildiklerinden, antikor bulunmadığı anlamına gelir. Bu nedenle, bağışıklık sisteminin geçmişte maruz kalmamış olması durumunda, örneğin belirli bir virüse karşı antikorlara sahip olması mümkün değildir.

Yukarıdakilerin tek istisnası, anti AB antijenleridir. Bu gibi durumlarda, kişi, başka birinin kırmızı kan hücreleri ile hiç temas etmemiş olsa bile, kırmızı kan hücrelerinin sahip olmadığı antijene karşı antikorlara sahiptir. Bu, doğal antikorlar olarak bilinir.

Kan grubu ile ilgili antijenler ve antikorlar

Kan grupları, ABO sistemi durumunda, kırmızı kan hücrelerinin zarında spesifik antijenlerin (A veya B) varlığı ve bunun aksine eritrosit zarında bulunmayan antijene karşı antikorların bulunmasıyla belirlenir.

Bu nedenle, kan grubu A olan bir kişi, kırmızı kan hücrelerinin yüzeyinde antijen A'yı eksprese ederken, serumda anti-B antikorları vardır.

Aksine, B grubu hastalarda antijen B bulunurken, antikorlar anti-A'dır.

Şimdi, AB kanı olan hastalarda hem A hem de B antijenleri vardır, bu nedenle, antikor yok, çünkü o kişinin kırmızı kan hücrelerini tahrip eder.

Bunun tersi, eritrosit zarı iki antijenden hiçbirini (ne A ne B) sunmadığı O grubunda meydana gelir; serumda anti-A ve anti-B antikorları bulunur.

ABO grubu uyumsuzluğu

Yukarıdan, ABO kan gruplarının uyumluluğu kolaylıkla çıkarılabilir, çünkü eritrosit membranının antijeni serumda otomatik olarak bilinen antikorlardır. Böylece:

- Kan A, A grubu ve O grubu ile uyumludur.

- Kan grubu B kan B ve O ile uyumludur.

- O grubu olan insanlar, yalnızca kan A'yı alabilirler (çünkü anti-A ve anti-B antikorları vardır), ancak kanları antijenlerden yoksun olduğundan problemsiz diğer tüm gruplar tarafından alınmaktadır.

- Sonunda. Kan grubu AB'ye sahip olanlar, antijenlerin hiçbirine karşı antikorları olmadığından, diğer tüm gruplardan (A, B, O ve tabii ki AB) kan alabilir. Bununla birlikte, sadece AB insanları AB kanı alabilir, çünkü diğer tüm gruplar bu kırmızı kan hücrelerini yok edecek antikorlara sahiptir.

Küçük antijenler

ABO gruplarında olduğu gibi, eritrositlerin yüzeyinde ABO grubunun antijenlerinde olduğu gibi antijen olarak işlev gören bir dizi protein bulunabilir.

Ancak, bu antijenler tüm bireylerde oluşmaz. Kombinasyonu heterojendir ve penetrasyon (proteinin ekspresyon seviyesi) değişkendir, dolayısıyla ABO ve Rh için var olan gruplar gibi sınıflandırılması imkansızdır. Oradan, adını "düşük insidanslı antijenler" olarak da bilinen "küçük antijenler" den alır.

Sık olmasalar da, küçük antijenlere karşı doğal antikorlar olabilir. Bunların arasında en yaygın olanları Lewis, MNS'ler, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb ve Kidd'dir. Hepsi çok ciddi hemolitik ve transfüzyon sonrası reaksiyonlardan sorumludur.

Ek olarak, daha önceki transfüzyonlar veya çapraz bağışıklıklar nedeniyle söz konusu antijenik proteinlerle önceden temas ettirilerek küçük antijenlere karşı duyarlılık vakaları olabilir.

Çapraz bağışıklık

İki farklı kaynaktan (örneğin kırmızı bir kan hücresi ve bir bakteri) iki antijenin, benzer antijenik proteinlerden birine karşı olan antikorların, diğerleriyle de reaksiyona girdiği noktaya çok benzer olduğu durumda, çapraz bağışıklığın olduğu söylenir. .

Daha iyi anlamak için, önceki varsayımsal örneği (bir kırmızı kan hücresi ve bakteri antijenleri) alın. Her iki durumda da doğal antikorlar mevcut değildir, ancak bir kişi bakterilere maruz kalırsa, buna karşı antikorlar üretecektir.

Bu antikorlar, bunun antijenleri, antikorların oluşumunu indükleyen bakterilerinkilere çok benzerse kırmızı kan hücresine karşı reaksiyona girer.

Bu olduğu takdirde, söz konusu antijenik proteine sahip kırmızı kan hücreleri, reddedileceği gibi antikorlara sahip olan kişiye uygulanamaz. Burada çapraz reaksiyonların önemi yatıyor.

Çapraz testler ne için?

Farklı bireylerin kanlarını küçük antijenlere göre gruplar halinde karakterize etmek mümkün olmadığından, bir kişinin kanında başka birinin kırmızı kan hücrelerinin küçük antijenlerine karşı antikorlar olup olmadığını öğrenmenin tek yolu çapraz testlerden geçer. .

Antikorların olduğu durumlarda, bir hemoliz veya aglütinasyon reaksiyonu tetiklenir, dolayısıyla reaksiyonun pozitif olduğu sonucuna varılır; yani, küçük antijenlere karşı antikorlar vardır (tam olarak ne olduğu bilinmese de). Aksi takdirde, test negatiftir.

vakıf

Çapraz testler, antijen-antikor reaksiyonuna dayanmaktadır. Bu nedenle, onlarla bir reseptörün serumunda, bir antijen-antikor reaksiyonunu indükleyen donörün kırmızı kan hücrelerinin antijenlerine karşı (veya bunun tersi) antikor olup olmadığını tespit etmek mümkündür.

Antikor yoksa, reaksiyon oluşmaz ve test negatif olarak rapor edilir. Tersine, eğer reaksiyon pozitifse (test sırasında hemoliz veya aglütinasyon var), antikorların mevcut olduğu sonucuna varılabilir.

Bu bakımdan, hem donör hem de alıcı serumda kırmızı kan hücrelerine karşı antikorlar olabileceğini not etmek önemlidir. İki tip çapraz reaksiyonun olmasının nedeni budur.

Çapraz reaksiyon çeşitleri

Hastanın serumunda donör eritrositlerine karşı antikorlar olması mümkündür; ancak bunun tersi de doğru olabilir, yani vericinin serumundaki hastanın kırmızı kan hücrelerine karşı antikorlar.

Bu nedenle iki tür çapraz test vardır:

- Büyük çapraz test.

- Küçük çapraz testi.

Her iki tip de, kan ürünlerinin transfüzyonundan önce kan bankasında rutin olarak yapılır, eğer herhangi bir test pozitifse hastanın yaşamını tehlikeye sokabilecek yüksek transfüzyon reaksiyonu riski vardır.

Büyük çapraz test

Bu testte, alıcının serumunda vericinin kırmızı kan hücrelerine karşı antikor olup olmadığı değerlendirilir.

Böyle bir durumda, kan plazmasında uygulanamaz, çünkü hastanın plazmasında bulunan çok sayıda anti-vücut, alıcının vücudundaki süreçte feci reaksiyonlar oluşturacak şekilde vericinin kırmızı kan hücrelerini çok hızlı bir şekilde tahrip eder. Bu tepkiler o kadar şiddetlidir ki, hayatınızı tehdit edebilir.

Küçük çapraz test

Bu durumda, donör serumunda alıcının kırmızı kan hücrelerine karşı antikor olup olmadığı belirlenir.

Eğer öyleyse, antikorlar reseptörün eritrositlerini yok etmeye başlayacaktır. Bununla birlikte, antikor miktarı sınırlı olduğu için reaksiyon daha az yoğunluğa sahiptir; hala tehlikeli olsa da.

fazlar

Hem büyük hem de küçük çapraz testler üç aşamaya ayrılır:

- Salina.

- Termal veya inkübasyon.

- Coombs.

İlk aşamada, kırmızı kan hücreleri ve serum salinle karıştırılır. Daha sonra, albümin eklenir ve örnek, son olarak coombs fazına devam etmek için 37 ° C'de 30 dakika inkübe edilir.

teknik

Çapraz test tekniği nispeten basittir, çünkü hastanın serumuna donör kırmızı kan hücreleri (majör çapraz test) ve ayrıca donör serumuna alıcı eritrositler (küçük çapraz test) eklenmesini içerir.

Antijen-antikor reaksiyonunu nispeten kısa bir sürede başlatmak için, bir dizi standartlaştırılmış adım izlenmelidir. Bu adımlar aşağıda basitleştirilmiş bir şekilde özetlenmiştir.

Aşağıdaki bölümde, daha küçük uyumluluk testi için aynı olmasına rağmen, kırmızı kan hücrelerinin ve serumun kökeninin değiş tokuşunun yapılmasına rağmen, daha sonraki uyumluluk testinin açıklandığı unutulmamalıdır.